1985年5月14日，翁美玲在家中因感情问题开煤气自杀，卒年26岁。1985年5月18日星期日，翁美玲的大殓仪式于上午11：00 时开始，她的遗体安祥地躺在棺木中，所穿的寿衣是她穿过的一件白底绣花古装戏服。
翁美玲与汤镇业的恋情总是被绯闻所纠缠，两个人彼此都有不少的香艳传说，这种状态注定了他们之间的关系是不稳定的。
1985年年初，从台湾拍片返回香港的汤镇业退掉了当时与翁美玲租在同单位的房子，由广播道又迁回他的居所美孚新村。当年的春节前(约2月份)，翁美玲偶然听说汤镇业又结交了别的女友，气愤之余一次性吞下四颗安眠药自杀，之后非常后悔，于是拨电话找到了医生帮助，逃过一劫。5月初，翁美玲因为面色苍白而被记者问其原因，她敷衍说由于吃错了药的缘故，这个回答更人疑窦丛生，猜测她又一次自杀未遂。第二天，汤镇业收拾放在翁美玲家中的衣物，不留一丝痕迹地分手，表明要与翁美玲一刀两断。
翁美玲经过一次死亡的“考验”，并没有因此看开，不久之后，她又打开煤气炉，想尝试在煤气里沉醉昏迷的感觉。但她刚打开煤炉就有朋友拜访，制止了她自杀的冲动。这时候的翁美玲，对生命已经灰心到了自暴自弃的地步。在香港，她的知心朋友不多，同辈的则更少。一次偶遇旧时男友亚历士，翁美玲于是向他诉苦说：“日拍晚拍都不知为了什么，红了，似乎没有目标，我曾经两度想辞职，去跟何家联讲，可是两次都找不着，辞职不成。”
以上翁美玲的口述似乎可以表明，她的自杀并非单纯的为情所困，而是来自于事业与爱情的双重困境。汤镇业在新浪做客聊天中所谈到应该是实情：“可能那时候她红得很快，一受到其他的压力，可能对她来说压力更大，而她也不希望自己掉下来，要保持自己的影响力和进度，在工作上的压力真的有，做艺人没有办法，看你怎么去看了。如果你把这个不要看得太重，你就无所谓了，不做第一，做第二，做不到第二做第三。乐观一点也许就好一些。如果一个人永远要做第一的话，那么你心里承受不了相应的压力，肯定会有问题。她在工作上是这样，在爱情上也是这样子，双重的压力，她更累。”
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